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如何将多肽溶解在DMSO中?

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如何将多肽溶解在DMSO中?

发布日期:2019-09-30 作者: 点击:

二甲基亚砜(DMSO)是一种含硫有机化合物,分子式为(CH3)2SO,常温下为无色无臭的透明液体。DMSO作为冷冻保护剂经常应用于细胞库。在细胞冷冻过程中,DMSO可防止胞内/胞外晶体的形成,其工作浓度为10%。DMSO通常可与盐或血清白蛋白结合。


疏水性多肽可以很容易地溶解在DMSO中。但DMSO可增加细胞的通透性,若多肽溶解于DMSO中则会对细胞产生毒性作用。高浓度的DMSO绝不可应用于细胞培养中。浓度为5%的DMSO即可让细胞膜溶解。大多数细胞株可以容忍0.5% DMSO,少许可以容忍1%的浓度,而不表现出严重的细胞毒性。然而原代细胞培养对其更敏感。所以如果是用原代细胞做剂量/反应曲线(可行性),其浓度应低于0.1%。


对于某些疏水性非常高的多肽,可先尝试将其溶解在少量的DMSO(30-50ul,100%)中,然后慢慢 (一滴一滴地)将其添加到不断搅拌的水溶液如PBS或其他想要的缓冲液中,直至理想浓度。如果滴加过程中,肽溶液开始变浑浊,说明已经达到了溶解极限。另外,超声波有助于多肽溶解。


经验:


对几乎所有的细胞来说,浓度为0。1%DMSO是安全的。

广泛被用于细胞培养的DMSO终浓度为0。5%,不会引起细胞毒性。

虽然对部份细胞来说,1%DMSO也不会产生细胞毒性,但我们推荐0。5%。

也有5%DMSO成功地应用于某些细胞的案例。

始终保持终浓度在0.5%,但储存时可200倍高浓度溶于100%的DMSO中。




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