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多肽定制药物如何做结构确证研究

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多肽定制药物如何做结构确证研究

发布日期:2018-07-28 作者:江苏吉泰肽业科技有限公司 点击:

多肽定制药物如何做结构确证研究

多肽结构研究的主要目的是要说明其氨基酸组成和序列是否正确。多肽分子中如有半胱氨酸,应明确其状态(氧化态或还原态),对含有多个半胱氨酸的多肽,应明确二硫键的正确连接位点。对于某些长肽,可能还需要采用核磁共振、园二色谱等方法对其空间结构(例如二级、三级结构)进行研究。

对于短肽,采用元素分析、红外光谱、核磁共振谱、氨基酸组成分析、质谱等常见方法,有时就足以说明其结构特征。如果上述测试取得的信息难以进行合理解析和归属,应进行氨基酸序列测定。

对于中、长肽应进行氨基酸组成和氨基酸序列分析。阐明氨基酸序列的通用方法是Edman降解,这种方法是测定N端氨基酸的一种化学方法;基于多种技术的质谱,如快原子轰击、电喷雾、场解析和激光解析质谱,可提供多肽的分子量及其序列信息,是对Edman降解的很好补充。

中、长肽的结构研究中,尽管紫外光谱、红外光谱、核磁共振谱等能够提供的可供分析的信息有限,但在一些情况下,上述研究还应考虑进行。例如,在可获得结构确证对照品时,进行上述谱图的对比测定,对于说明所研制产品的结构有重要意义;对于全新结构的多肽,进行上述研究,也可为说明多肽结构提供辅助信息,并为质量研究和质量标准的制订提供信息。

对于含有20个以上氨基酸残基的多肽,如不能直接确定其序列,可根据多肽分子量大小及氨基酸组成特点,使用专一性较强的蛋白水解酶(一般为肽链内切酶)将多肽裂解成小片段,再分析各小片段的序列。

当多肽中含有非天然氨基酸及氨基酸衍生物时,结构研究中应予以证明。此时,应在相应的研究中,考察这些非天然氨基酸及氨基酸衍生物的色谱行为。


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